液相色谱仪是一种分离与分析仪器，其特点是以液体作为流动相，固定相可以有多种形式，如纸、薄板和填充床等。在色谱仪发展的过程中，为了区分各种方法，根据固定相的形式产生了各自的命名，如：纸色谱、薄层色谱和柱液相色谱。

　　1、色谱仪氘灯：

　　色谱仪开始进样前30分钟开氘灯即可，节约灯的能量和使用时间。

　　2、流动相的使用和注意事项：

　　①所用流动相必须预先滤过和脱气，流动相一般贮存于玻璃不锈钢容器内。贮存容器一定要盖严，防止溶剂挥发引起组成变化。磷酸盐、乙酸盐缓冲液很易长霉，应尽量新鲜配制使用，不要长期贮存。容器应定期清洗，特别是盛水、缓冲液和混合溶液的瓶子，以除去底部的杂质沉淀和可能生长的微生物。

　　②配制流动相用水需为纯净水或经超声过滤后的纯化水，流动相配制好后先用直径为5cm，孔径为0.45um的滤膜，通过沙芯过滤器的过滤，然后在超声仪上超声。

　　③不得将装流动相的容器直接放置与超声仪内，需放与筛网上进行超声。

　　3、六通阀的使用和维护注意事项：

　　①样品溶液进样前必须用滤膜过滤，以减少微粒对进样阀的磨损。

　　②转动阀芯时不能太慢，更不能停留在中间位置，否则流动相受阻，使泵内压力剧增，甚至超过泵的Zda压力；再转到进样位时，过高的压力将使柱头损坏。

　　③为防止缓冲盐和样品残留在进样阀中，每次色谱仪分析结束后应冲洗进样阀。通常可用水冲洗，或先用能溶解样品的溶剂冲洗，再用水冲洗。

　　4、色谱柱柱压升高的主要因素：

　　①泵的单向阀堵塞。

　　②色谱柱的入口筛板堵塞。

　　③吸滤头堵塞。

　　④PEEK管接口处堵塞。

　　5、色谱柱柱压不稳的因素：

　　①液相色谱仪泵内有空气。

　　②泵密封垫损坏。

　　③溶剂中的气泡。

　　④系统检漏，找出漏点。

　　6、样品峰保留时间漂移的主要因素：

　　①室内温度变化过大。

　　②流动相成分发生变化。

　　③色谱仪色谱柱未平衡好。

　　④色谱仪泵中有气泡。

　　⑤该流动相是否适宜此样品的检测。

　　7、基线漂移的主要因素：

　　①柱温波动。

　　②流动相不均匀。

　　③流通池被污染或有气体。

　　④色谱仪检测器出口阻塞。

　　⑤流动相配比不当或流速变化。

　　⑥流动相污染、变质。

　　⑦使用循环溶剂。

　　8、色谱仪检测器灵敏度不够的主要因素：

　　①样品进样量不足。

　　②波长设置不正确。

　　③检测器池窗污染。

　　④检测池中有气泡。

　　⑤电压不稳。

　　⑥流动相流速不合适。

　　9、色谱柱的使用和维护注意事项：

　　①避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。

　　②应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂改变为全部是水，反之亦然。

　　③一般说来色谱仪色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。

　　④选择使用适宜的流动相(尤其是pH)，以避免固定相被破坏。

　　⑤避免将复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内，需要对样品进行预处理或者在色谱仪进样器和色谱柱之间连接一保护柱。

　　⑥经常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。

　　⑦保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防止溶剂挥发干燥。禁止将缓冲溶液留在柱内静置至次日或更长时间。

　　⑧色谱柱使用过程中，如果压力升高，一种可能是滤片被堵塞，这时应更换滤片或将其取出进行清洗；另一种可能是大分子进入柱内，使柱头被污染；如果柱效降低或色谱峰变形，则可能柱头出现塌陷，死体积增大。

　　⑨以硅胶为基质的填料，只能在pH2~9范围内使用。色谱仪每次分析检测完成后，*用洗脱能力强的洗脱液冲洗，例如ODS柱宜用甲醇冲洗至基线平衡。

　　10、色谱仪样品：

　　液相色谱仪样品必须用直径为2.5cm，孔径为0.45um的滤膜针式过滤。如有明确要求需用离心过滤的，经离心过滤后取上清液即可。